液相色谱是目前物质组分微量分析的重要方法之一。色谱分析中两相是指具有大比表面积的固定相和携带有待分离的混合物流过固定相的流动相。用液体作流动相的称液相色谱。
液相色谱又称“液相层析”。一种色层分析方法,所用流动相为液体。由于层析柱内液体比气体受的阻力大,故为了提高分析速度,通常采用高压输液方式,所以又称为“高压液相色谱”。根据固定相的不同可分为液—固色谱和液—液色谱;根据固定相与流动相所发生平衡的类型不同,可分为吸附色谱、分配色谱、离子交换色谱和凝胶色谱等。用于有机物,无机物和高分子液体的分离及分析。
液相色谱检测原理:
1、高效液相色谱法的原理是以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测。
2、高效液相色谱法的特点:
①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,所以必须对载液加高压。
②高速:分析速度快、较经典液体色谱法速度快得多。
③高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果。
④高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
⑤应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是大分子、高沸点、热稳定性差化合物的分离分析。