液相色谱仪利用混合物各组分在固定相和流动相中溶解、分配或吸附等化学作用性能的差异,使各组分在作相对运动的两相中反复多次受到上述各作用力而达到相互分离。从液相色谱仪工作流程中看到,色谱柱是实现分离的核心部件,要求柱效高、柱容量大和性能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。
液相色谱仪常用的脱气方法:
1、吹氦脱气法:
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa压力下,以约60mL/min流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个高效分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L氦气通过1L流动相就可完成排气这个工作。液相色谱仪这种脱气方法虽然好,但我国氦气价格较高,很少有实验室采用此方法。
2、加热回流法:
此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。
3、抽真空脱气法:
此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4、超声波脱气法:
将欲脱气的流动相置于超声波清洗器中,用超声波震荡10~20min。此法的脱气效果Z差。
5、在线脱气法:
现在的液相色谱仪,均可配在线脱气机。在线脱气机使用简单,低故障,有效。建议购买液相色谱仪时一并购买,有的公司是作为选购件,所以与仪器公司谈配置时应与之确认。