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高效液相色谱分析过程中对定性分析有哪些要求

发布时间:2022-05-18      点击次数:223
  HPLC过程中影响待测组分迁移的因素较多,同一组分在不同色谱条件下的保留值可能相差很大。即便在相同的操作条件下,同一组分在不同色谱柱上的保留值也可能有很大差别。因此,在高效液相色谱分析过程中,对定性分析方法提出了更高的要求。
  (1)利用检测器的选择性进行定性将经色谱柱分离后的样品引入并联或串联的几种不同检测器,根据它们不同的检测性能,视其出峰情况可以初步判别出未知化合物的具体类别。
  (2)反相色谱中的“a、C”指数定性在以硅胶为固定相的反相色谱中,待测组分保留值与流动相组成关系式中的系数能够反映待测组分的结构特征,因此可用于待测组分的辅助定性。
  反相色谱中有机调节剂的浓度c与待测组分的分配比之间满足对数线性关系,可表示为:
  lnk=a+Cc(10.8)
  式中,a、C分别为与流动相性质、固定相性质有关的常数。
  基于式(10.8),卢佩章等列出了460种化合物在C18柱上不同条件下的a、C指数,并提出可不同柱系统、不同冲洗剂浓度组成时,a、C指数之间的换算方法。在相同的色谱条件下,如果样品中某一组分的a、C指数与某已知标样相同,即可认定两者为同一种化合物。
  此外,待测组分的分配比k作为一种结构型物性参量,其对数值与同系物碳数n之间存在良好的线性关系。
  lnk=a+bm(10.9)
  式中,a、b为常数。对于包含同系物组分的样品,如果已知部分同系物在色谱图中的位置,此时,可以根据碳数规律来推测其他同系物组分。
  
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