如何计算液相色谱柱的柱体积

　　提高液相色谱中柱效的有效途径有：减小填料粒径，增加色谱柱长，使用尽量大小均一、外型规则的填料，使用合适的流速，使用合适的流动相组成，使用合适的固定相。

　　高效液相色谱的工作方式：

　　在柱层析中，溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。高效液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下，泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒（如二氧化硅或聚合物）制成的颗粒材料。

　　与柱色谱相比，利用泵输送，不仅可以快速分析，而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小，其表面积更大，通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用，可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂（如水、乙腈、甲醇）的混合物。

　　混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离，在此过程中不同组分的洗脱速率不同，从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比，高效液相色谱自动化程度高，灵敏度高。

　　液相色谱柱柱体积计算同圆柱体体积计算：

　　具体计算过程如下：

　　1、可将液相色谱柱近似看成一个圆柱体，圆柱体体积计算公式为V=π*r*r*h，其中r为液相色谱柱的半径，h为液相色谱柱的长度（即圆柱体的高）。

　　2、液相色谱柱型号为4.6x250mm：则代表内径（直径）=4.6mm，则半径=2.3mm，长度=250mm，所以其柱体积为V=3.14*2.3*2.3*250=4152.6立方毫米，换算成ml为4.15265ml，即液相色谱柱4.6x250mm的一个柱体积为4.15265ml（在基本不考虑柱死体积的情况下）。

　　3、液相色谱柱4.6x250mm的30个柱体积为4.15265ml*30，为124.5795ml，约124.6ml（在基本不考虑柱死体积的情况下）。