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如何计算液相色谱柱的柱体积

发布时间:2022-01-20      点击次数:327
  提高液相色谱中柱效的有效途径有:减小填料粒径,增加色谱柱长,使用尽量大小均一、外型规则的填料,使用合适的流速,使用合适的流动相组成,使用合适的固定相。
  高效液相色谱的工作方式:
  在柱层析中,溶剂在重力作用下滴入装有吸附剂的色谱柱中。高效液相色谱是一种改进的柱色谱。在高达400个大气压的高压下,泵输送溶剂通过色谱柱。柱吸附剂或固定相通常是由固体颗粒(如二氧化硅或聚合物)制成的颗粒材料。
  与柱色谱相比,利用泵输送,不仅可以快速分析,而且可以使用更小的颗粒作为柱填料。粒子越小,其表面积更大,通过固定相与流动相及样品组分之间的相互作用,可以更好地实现混合物中各组分分离。流动相通常是溶剂(如水、乙腈、甲醇)的混合物。
  混合物的组分由于与吸收剂颗粒的相互作用的程度不同而彼此分离,在此过程中不同组分的洗脱速率不同,从而导致组分流出色谱柱时分离。与柱色谱相比,高效液相色谱自动化程度高,灵敏度高。
  液相色谱柱柱体积计算同圆柱体体积计算:
  具体计算过程如下:
  1、可将液相色谱柱近似看成一个圆柱体,圆柱体体积计算公式为V=π*r*r*h,其中r为液相色谱柱的半径,h为液相色谱柱的长度(即圆柱体的高)。
  2、液相色谱柱型号为4.6x250mm:则代表内径(直径)=4.6mm,则半径=2.3mm,长度=250mm,所以其柱体积为V=3.14*2.3*2.3*250=4152.6立方毫米,换算成ml为4.15265ml,即液相色谱柱4.6x250mm的一个柱体积为4.15265ml(在基本不考虑柱死体积的情况下)。
  3、液相色谱柱4.6x250mm的30个柱体积为4.15265ml*30,为124.5795ml,约124.6ml(在基本不考虑柱死体积的情况下)。
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