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高效液相色谱仪使用过程中会出现的症状及处理方法

发布时间:2021-08-09      点击次数:178
   北京创新通恒科技LC3000U型高效液相色谱仪是一款基于嵌入式操作系统,全新设计的新一代色谱仪系统。
  本系统主要由P3000U.UV3000U(或UV3000UD)组成,外观美观大方,操作便利,运行可靠,是常规分析实验室常用的分析仪器。本系统可广泛的用于医药、制药、食品、卫生防疫、环保等多个领域。下面讲讲使用过程可能会遇到的症状及处理方法:
  症状:
  (一)保留时间变化
  可能的原因:解决方法
  1.柱温变化:柱恒温;
  2.等度与梯度间未能充分平衡:至少用10倍柱体积的流动相平衡柱;
  3.缓冲液容量不够:用>25mmol/L的缓冲液;
  4.柱污染:每天冲洗柱;
  5.柱内条件变化:稳定进样条件,调节流动相;
  6.柱快达到寿命:采用保护柱;
 
  (二)保留时间缩短
  可能的原因:解决方法
  1.流速增加:检查泵,重新设定流速;
  2.样品超载:降低样品量;
  3.键合相流失:流动相PH值保持在3-7.5检查柱的方向;
  4.流动相组成变化:防止流动相蒸发或沉淀;
  5.温度增加:柱恒温;
 
  (三)保留时间延长
  可能的原因:解决方法
  1.流速下降:管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡;
  2.硅胶柱上活性点变化:用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱;
  3.键合相流失:同前(二)3;
  4.流动相组成变化:同前(二)4;
  5.温度降低:同前(二)5;
 
  (四)出现肩峰或分叉
  可能的原因:解决方法
  1.样品体积过大:用流动相配样,总的样品体积小于第一峰的15%;
  2.样品溶剂过强:采用较弱的样品溶剂;
  3.柱塌陷或形成短路通道:更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件;
  4.柱内烧结不锈钢失效:更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品;
  5.进样器损坏:更换进样器转子;
 
  (五)鬼峰
  可能的原因:解决方法
  1.进样阀残余峰:每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗;
  2.样品中未知物:处理样品;
  3.柱未平衡:重新平衡柱,用流动相作样品溶剂(尤其是离子对色谱);
  4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽谱):每天新配,用抗氧化剂;
  5.水污染(反相):通过变化平衡时间检查水质量,用HPLC级的水;
 
  (六)基线噪声
  可能的原因:解决方法
  1.气泡(尖锐峰):流动相脱气,加柱后背压;
  2.污染(随机噪声):清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂;
  3.检测器灯连续噪声:更换氘灯;
  4.电干扰(偶然噪声):采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等);
  5.检测器中有气泡:流动相脱气,加柱后背压;
 
  (七)峰拖尾
  可能的原因:解决方法
  1.柱超载:降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相;
  2.峰干扰:清洁样品,调整流动相;
  3.硅羟基作用加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品;
  4.同前(四)4:同前(四)4;
  5.同前(四)35.:同前(四)3;
  6.死体积或柱外体积过大:连接点降至,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管;
  7.柱效下降:用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱;
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