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DNA合成仪的在生物学中的应用

发布时间:2016-07-25      点击次数:299
  
  DNA合成仪 -在生物学中的应用
  
  DNA合成仪在分子生物学领域中的应用非常广泛,大体可以概括为以下几个方面。
  
  1.合成PCR引物,DNA测序引物和杂交探针
  
  2.合成生物素标记的DNA包括生物素标记的引物
  
  用于DNA固相测序法(solid-phasesequencing),采用生物素标记的引物进行PCR扩增,再用抗生物素蛋白钓出扩增产物,由于抗生物素蛋白与磁珠共价结合,所以用磁铁吸附即可钓出扩增产物,大大简化了DNA测序模板的纯化步骤。此外,生物素标记的探针用于非放射性杂交检测。DNA合成仪可用于合成生物素标记的探针和引物。
  
  3.合成荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物
  
  可在合成的DNA片段5’端标记几种不同颜色荧光素(6-FAM、TET、HEX),用于全自动DNA测序仪,还可用于PCR片段大小分析及定量分析,即基因组型分析和基因表达水平的研究。此外荧光素标记的探针用于原位PCR杂交检测,进行基因在染色体上的定位。而荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物皆可采用DNA合成仪进行合成。
  
  4.合成反义核酸
  
  反义核酸可用于反义调控和基因治疗。反义调控指在体外合成与靶序列互补的DNA片段,转化细胞后与靶序列结合,即在转录水平上抑制基因表达,但由于细胞内存在限制酶系统会把外源核酸降解,所以反义核酸要经硫化修饰后再转化细胞。另外癌症、艾滋病等也可采用反义核酸进行基因水平的治疗。DNA合成仪是合成反义核酸的仪器。
  
  5.合成磷酸标记的DNA
  
  用DNA连接酶把合成的磷酸标记的DNA片段连接起来,在体外进行基因构建。磷酸标记的DNA常用DNA合成仪来合成。
  
  6.合成RNA
  
  用DNA合成仪合成的RNA主要用于核酶研究,核酶可作为生物导弹转化到细胞中,定点切割有病基因,如癌基因等。
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