DNA合成仪的在生物学中的应用

　　

　　DNA合成仪 -在生物学中的应用

　　

　　DNA合成仪在分子生物学领域中的应用非常广泛，大体可以概括为以下几个方面。

　　

　　1．合成PCR引物，DNA测序引物和杂交探针

　　

　　2．合成生物素标记的DNA包括生物素标记的引物

　　

　　用于DNA固相测序法(solid-phasesequencing)，采用生物素标记的引物进行PCR扩增，再用抗生物素蛋白钓出扩增产物，由于抗生物素蛋白与磁珠共价结合，所以用磁铁吸附即可钓出扩增产物，大大简化了DNA测序模板的纯化步骤。此外，生物素标记的探针用于非放射性杂交检测。DNA合成仪可用于合成生物素标记的探针和引物。

　　

　　3．合成荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物

　　

　　可在合成的DNA片段5’端标记几种不同颜色荧光素(6-FAM、TET、HEX)，用于全自动DNA测序仪，还可用于PCR片段大小分析及定量分析，即基因组型分析和基因表达水平的研究。此外荧光素标记的探针用于原位PCR杂交检测，进行基因在染色体上的定位。而荧光素标记的DNA包括荧光素标记的引物皆可采用DNA合成仪进行合成。

　　

　　4．合成反义核酸

　　

　　反义核酸可用于反义调控和基因治疗。反义调控指在体外合成与靶序列互补的DNA片段，转化细胞后与靶序列结合，即在转录水平上抑制基因表达，但由于细胞内存在限制酶系统会把外源核酸降解，所以反义核酸要经硫化修饰后再转化细胞。另外癌症、艾滋病等也可采用反义核酸进行基因水平的治疗。DNA合成仪是合成反义核酸的仪器。

　　

　　5．合成磷酸标记的DNA

　　

　　用DNA连接酶把合成的磷酸标记的DNA片段连接起来，在体外进行基因构建。磷酸标记的DNA常用DNA合成仪来合成。

　　

　　6．合成RNA

　　

　　用DNA合成仪合成的RNA主要用于核酶研究，核酶可作为生物导弹转化到细胞中，定点切割有病基因，如癌基因等。