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中压制备色谱的操作方法介绍

更新时间:2023-04-07      点击次数:911
  中压制备色谱是一种广泛应用于药物、化学、食品等领域的分离纯化技术。其作用是对复杂混合物进行分离纯化,从中得到目标化合物。
  中压制备色谱可用于分离纯化天然产物、合成物或混合物。其作用是将复杂的混合物分离成单一化合物或纯化化合物。与其他分离方法相比,中压制备色谱具有分离效率高、选择性好、操作简单等特点,因此被广泛应用于药物、化学、食品等领域。
  分离原理是根据化合物在不同稳定相(固体或液体)中的分配行为,通过它们与固定在柱上的特定填料的相互作用来实现。填料具有不同的亲和性,可以选择性地吸附或排除不同化合物,以实现分离和纯化目的。常用的填料有硅胶、OCTADECYL硅胶、石墨碳和氮化硅(C18)等。
  中压制备色谱的操作方法:
  1.前处理
  样品准备:为了得到准确的色谱分析结果,样品必须具有高度纯度。混合物可以通过提取、分离和纯化等方法进行前处理。
  溶剂选择:在进行色谱分析之前,必须选择合适的流动相。通常用于中压制备色谱中的流动相是有机溶剂(如甲醇、乙醇、醚等)和水的混合物。
  2.柱选择与填料选择
  柱选择:柱是中压制备色谱的核心部分。对于中压制备色谱,通常选择内径较大的柱(10-50mm)。
  填料选择:常用的填料有硅胶、OCTADECYL硅胶、石墨碳和C18等。选择填料应根据化合物的极性和化学性质进行。
  3.装柱和校准
  装柱:将选好的填料放入柱中,使之均匀分布。
  校准:根据样品性质选择合适的流动相和温度等条件,确定最佳分离条件。
  4.色谱分离实验
  将样品溶液加入柱中,通过未固定的化学互作用,使其分离成单一或纯净化合物。同时,记录样品进入柱和流经柱的时间,并根据判断溶液进出时间的间隔来评估分离效果。
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