色谱仪的衍生化主要是为了提高目的物的可检测性。对于气相色谱,主要是为了增强目的物的挥发性或改善目的物的极性。对于液相色谱仪,主要是为了提高检测器对目的物的响应。
一、衍生化分类:
1、柱前衍生:在分析物经过色谱柱前与衍生剂反应,反应产物在色谱柱上实现分离,实际分离的是衍生产物,检测的也是衍生产物。
2、柱后衍生:分析物在色谱柱中实现分离后,在衍生池内与衍生剂反应,检测的是衍生产物。
二、适用的化合物:
生物酸、生物碱、胺类、抗生素和氨基酸类等。
三、衍生化要求:
1、衍生剂必须过量且稳定。衍生剂不过量,反应不*,检测不充分。衍生剂不稳定,重现性差。
2、衍生剂、衍生产物和衍生副产物容易分离。只能检测到衍生产物。
3、衍生反应快速、*。
四、柱前衍生特点:
1、优点:
(1)相对自由地选择反应条件。
(2)不存在反应动力学的限制。
(3)衍生副产物可进行预处理,以降低或消除其干扰。
(4)容易允许多步反应的进行。
(5)有较多的衍生剂可选择。
(6)不需要复杂的仪器设备。
2、缺点:
(1)形成的衍生副产物可能对色谱分离造成较大困难。
(2)在衍生化过程中,容易引入杂质,或损失样品。
五、柱后衍生特点:
1、优点:
(1)重现性好,影响因素少,引入物质比较少。
(2)分析物可以在其原有的形式下进行分离,容易选用已有的分析方法。
2、缺点:
(1)对于一定的溶剂和有限的反应时间来说,目前只有有限的反应可供选择。
(2)可能有扩散问题。
(3)需要额外的仪器设备。