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制备型液相色谱仪的分离目的是从混合物中得到纯物质

发布时间:2022-07-27      点击次数:30
  制备型液相色谱仪的分离目的是从混合物中得到纯物质。为了缩短分离时间和提高分离效率,制备型液相色谱的的进样品量很大,导致色谱柱的分离负荷相应加大,因此必须加大色谱柱填料,增大柱内径和柱长,使用的流动相相对增多。然而,当色谱柱上的样品负载加大时,往往会导致柱效急剧下降而得不到纯产品。制备型液相色谱要解决容量与柱效之间的矛盾,对重现性也要考虑。从经济上来说,要少用填料,少用溶剂,尽可能多的得到产品。
  一、样品的前处理:
  制备型液相色谱柱分离的样品多,比分析型液相色谱柱更容易受污染,样品前处理非常必要。
  二、TFA在缓冲液中的作用:
  1、TFA起到类似离子对的作用,一般浓度在0.05%~0.1%。浓度过高会使溶液偏酸,长时间使用可能影响色谱柱寿命。
  2、TFA可抑制硅胶表面的硅醇基,改善碱性化合物的峰形。若0.1%TFA分离不好,可加大浓度到0.2%,但用完后要及时冲洗色谱柱。
  3、走梯度时走成基线漂移,但对制备影响不大。
  三、降低柱压的方法:
  采用1%乙酸水溶液和甲醇二元梯度。
  四、提高检测下限的方法:
  1、如果是等度洗脱,一定要改成单元等度。
  2、尽量采用乙腈-水系统洗脱。乙腈紫外吸收小,相同条件下噪音小。
  五、用水要求:
  不含金属离子和细菌。
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